Determinarea numărului de trombocite din sânge

Determinarea numărului de trombocite - o metodă cheie de cercetare, capabil de a detecta cele mai frecvente probleme cu potențial hemostatic sânge - trombocitopenie. În prezent, pentru a determina numărul de trombocite are mai multe tehnici de laborator (automate de fonio et al.). Cea mai mare precizie este metoda microscopică în calculul camerei, dar această metodă necesită un medic de laborator experiență de dureri de ochi, de concentrare.

Principiul metodei

Principiul metodei se bazează pe determinarea numărului de trombocite prin numărarea lor într-o cameră de Goryaev sau microscopie optică convențională folosind un microscop cu contrast de fază diluție de sânge prefix după hemoliza celulelor roșii din sânge și oxalat de amoniu.

Pentru a îmbunătăți precizia metodei numărului de trombocite microscopice numărate în cele două camere, și apoi prin calcularea mediei aritmetice.

Reactivi și echipament

• soluție de oxalat de amoniu 1%.
• mixer Sali.
• Camera Goryaev (2 buc.).
• Microscopul lumina cu o mărire de 40 x microscop sau cu prefix de contrast de fază (de exemplu, CF4 sau altele asemenea.).

Probele de sânge pentru cercetare

Determinarea numărului de trombocite din sânge, eventual stabilizat cu citrat de sodiu sau depuse pe pereții tuburilor din plastic de pulbere fină de acid etilendiaminotetraacetic (EDTA). Când se folosește o metodă microscopică iau sânge în citrat de sodiu preferabil să se elimine efectul EDTA asupra rezultatelor numărului de trombocite.

tehnica de performanță

Un tub de plastic uscat este fabricat din 1,98 ml de oxalat de amoniu 1% și 0,02 ml de sânge. Încet și ușor agitat timp de 2 minute și apoi a fost incubat timp de 20 min la temperatura camerei. Mai mult, două camere pline cu conținut tuburi Goryaeva și timp de 10 minute, le-a pus într-un vas Petri, care este filtru de tifon umed sau ud. După această incubare, care este necesară pentru sedimentarea plachetelor numărate număr de 25 de pătrate. Media aritmetică a rezultatelor numărării în cele două camere multiplicate cu 1000. În rezultatul investigării sângelui citrata este crescut cu 10% și înmulțit cu 1000, ceea ce permite corectarea soluție de citrat de sodiu din sânge venos de diluare.

Video: Trombocitele, plus trombocite crescut, minus trombocitele reduse în testele de sânge

Evaluarea rezultatelor studiului

Într-o persoană sănătoasă numărul de trombocite din sângele periferic variază într-o gamă destul de largă - 150 - 400 x 109 / L.

Studiul Inadmisibile numărul de trombocite din probele de sânge în condiții de refrigerare. Când hemoliza posibil subestimare a numărului de trombocite. În unele cazuri, în studiul numărului de trombocite de pe analizoare de hematologie pseudotrombocitopenia întâlnește așa-numita datorită agregării plachetare și gruparea în prezența EDTA. Această problemă este rezolvată în probele de sânge de citrat de sodiu.

Pentru a asigura un control al calității la numărarea numărului de trombocite de pe analizoare hematologie, există probe de control cu ​​diferite conținuturi ale acestor celule. Cu privire la posibilitatea de a folosi aceste probe pentru a asigura controlul calității în calcularea numărului de trombocite metoda de analiză microscopică nu există recomandări general acceptate. Pentru a îmbunătăți acuratețea rezultatelor examinării microscopice ar trebui să monitorizeze periodic reproductibilitatea determinarea numărului de trombocite din diferite tehnicieni de laborator în timpul zilei de lucru și pe baza datelor primite pentru a îmbunătăți acuratețea și variația mai mică atunci când coeficientul de variație a acestei tehnici metode microscopice în laborator experimental nu depășește 10%.

Video: abilități practice în fiziologie numărând de celule roșii din sânge

Interpretarea rezultatelor sondajului

Tabloul clinic al purpură trombocitopenică idiopatică sindrom sever hemoragic dominant. Când sindromul trombotic hemoragic secundar, în general moderate, și combinate cu simptomele clinice ale bolii de baza, care contribuie la trombocitopenie. În acele cazuri în care numărul de trombocite mai mic de 100 x 109 / L lung observate fără manifestări de boală care stau la baza, ar trebui să se gândească la purpură trombocitopenică idiopatică.

Trombocitoza se observă și în tulburări mieloproliferative. De multe ori în fundal mieloproliferatsii marca de încălcare proprietățile reologice ale poliglobulii din cauza sângelui. În acest ultim caz, precum și un număr de trombocite mai mare de 700 x 109 / l la pacienții crește riscul de tromboză. Cu toate acestea împotriva bolilor mieloproliferative asociate trombocitoza 1500 x 109 / L, sindrom hemoragic paradoxal observat.

În prezența istoriei trombocitopenie si hemoragica din copilarie este extrem de important pentru a estima dimensiunea de trombocite în t. H. MPV (valoarea medie a volumului) într-un frotiu de sânge, și, de asemenea, prezența oricăror incluziuni în trombocite.

Cauzele erorilor

• Folosind o singura camera, mai puține pătrate numărate.
• Inexactitatea calibrarea diferitelor mixere.
• Erori de fază preanalytical a studiului, în Vol. H. Dozajul greșită citrat la un gard de sânge venos.
• Calificarea insuficientă a unui laborator.

Alte tehnici analitice

Practic, toate analizoare hematologice o bună măsură numărul de celule roșii din sânge și leucocite, rezultate bune sunt exacte și reproductibile de determinare demonstrează concentrației hemoglobinei puse în aplicare în astfel de dispozitive. Cu toate acestea, în prezent, există mai multe analizoare de probe care numărul de leucocite pentru numărul de trombocitopenie este inexactă, și de regulă, există o supraestimare a numărului de trombocite în numărarea lor automată. Mai ales se arată în mod clar acest neajuns când se manipulează probe de sânge, în care numărul de trombocite este sub 50 x 109 / L. Acest neajuns este o consecință a faptului că trombocitele sunt mult mai mici decât alte celule sanguine, atât de dificil de a efectua o numărătoare corectă le în aceeași celulă și aceleași tehnici ca și alte celule sanguine. De asemenea, trebuie remarcat faptul că precizia de numărare pe trombocite parametri analizor hematologie influență foarte semnificativă calitatea și fiabilitatea calibratoarele utilizate. Acesta este motivul pentru care în situații dificile de diagnostic sau trombocitopenie severă în istorie pentru a clarifica numărul de trombocite trebuie utilizat o tehnica microscopică.

Numărarea celulelor sanguine în frotiuri colorate au o precizie scăzută și reproductibilitate, deci nu poate fi recomandat pentru utilizarea in spitale moderne.