Metode pentru examinarea microscopică a microorganismelor

Video: Microbiologie. Preparate fixe de preparare (E. Zvonaryova)

conținut

Video: microbiologie. preparate fixe de preparare (e. zvonaryova)
Microscopie cu câmp luminos
Microscopia darkfield
Microscopie cu contrast de faza
Microscopie fluorescentă
Microscopie electronică

Cea mai mică dimensiune a microorganismelor sunt responsabile pentru utilizarea bacteriilor pentru a studia morfologia de instrumente optice de precizie - microscoape. Microscopia mai frecvent utilizate luminos câmp, microscopie cu câmp întunecat, în contrast de fază și microscopie cu fluorescență. Pentru studii microbiologice speciale folosind microscopie electronică.

microscopie cu câmp luminos

microscopie cu câmp luminos se realizează cu ajutorul unui microscop optic convențional, partea principală care este obiectivul. Pe marginea lentile de mărire notate: 8, 10, 20, 40, 90.

In studiul de microbi sistem de imersie (obiectiv) utilizat. lentile de imersiune este cufundat într-o picătură de ulei de cedru, aplicat la medicament. Uleiul de cedru are același indice de refracție ca sticla, iar acest lucru se realizează prin cele mai mici raze de lumină scatter (Fig. 1.12).

Fig. 1.12. Razele de curs în obiectivul de imersie

Imaginea obținută prin lentila crește ocular constând din două lentile. La ocularele microscop interne sunt utilizate cu o creștere de 7, 10, 15 (fig. 1.13). Mărirea totală a microscopului este determinată de produsul lentilei pentru a crește factorul de mărire al ocularului. În microbiologie este de obicei folosit pentru a crește în 900-1000 ori. Calitatea microscopului nu depinde de gradul de creștere, dar rezoluția acestuia.

Fig. 1.13. Schema de microscop cu lumină complexă pentru observarea în câmp luminos, ajustat pentru iluminare Koehler

Prin aceasta trebuie să înțelegem cea mai scurtă distanță dintre două puncte este un preparat în care acestea sunt în mod clar distinse sub microscop. Rezoluția microscopului convenționale de lumină cu sistem de imersie este de 0,2 microni.

microscopia darkfield

Microscopia în câmp întunecat de vedere se bazează pe principiul următor (Fig. 1.14). Raze ilumina obiectul nu este în partea de jos, iar partea și nu se încadrează în ochiul observatorului: câmpul de vedere rămâne întunecat, iar obiectul este iluminat pe fundal. Acest lucru se realizează printr-un condensator special (paraboloid) sau un condensator convențional, acoperit în centrul unui cerc de hârtie neagră.

Fig. 1.14. Conducerea microscop pentru observarea într-un câmp întunecat.

Pregătirile pentru microscopie darkfield este preparat pe tipul de „agățat“ și picătură „zdrobit“. Când se prepară medicament „zdrobit“ material test de cădere (o cultură bacteriană în soluție salină), se aplică pe o lamelă de sticlă, care este acoperit cu un capac de sticlă. Material picătură umple tot spațiul dintre capac și glisiera pentru a forma un strat uniform. Pentru a pregăti „agățat“ picături necesare pentru a utiliza slide-uri speciale de sticlă, cu o adâncitură în centru și de acoperire ochelari.

In mijlocul materialului de testare din sticlă de acoperire acoperit. Marginile șanțurile de pe geamul de diapozitive unse cu vaselina, și au acoperit geamul de acoperire, astfel încât scăderea a fost împotriva centru de aprofundare. Apoi, inversat de pregătire în sus lamelă. microscopie Darkfield este folosit pentru a studia organismele vii nevopsită.

microscopie cu contrast de faza

Când se trece fasciculul de lumină prin obiectul acromatice se modifică numai fluctuațiile de fază ale undei de lumină care nu este percepută de ochiul uman. Până când imaginea este contrastul, este necesar să se transforme schimbarea de fază a amplitudinii de undă a luminii vizibile. Acest lucru este realizat prin lentila contrast de fază condensator și fază (fig. 1.15).

Fig. 1.15. Faza de Schema microscop cu contrast.

Phase-contrast condensator este o lentilă convențională cu un revolver și un set de diafragme inelare pentru fiecare lentilă. O lentilă de fază are o placă de fază, care se obține prin aplicarea de sare de pământuri rare pe obiectiv. Inel diafragmă inelară Image coincide cu faza plăcii obiective corespunzătoare.

microscopie de contrast de fază îmbunătățește în mod semnificativ contrastul obiectului, și este utilizat pentru studiul preparatelor native.

microscopie fluorescentă

microscopie de fluorescenta se bazează pe capacitatea anumitor substanțe sub influența iradieri luminii incidente pe lungimea de undă de alta (de obicei mai mare) (fluorescență). Astfel de substanțe sunt numite fluorocrom (acridin galben, rodamina, etc.). Obiectul fluorocrom tratat prin lumina ultravioletă devine de culoare luminoase în câmpul vizual întunecat.

Partea principală a microscopul cu fluorescență este un iluminator având o lampă și un sistem de filtre de culoare ultravioleta la aceasta (fig. 1.16). Este important să se utilizeze un ulei de imersie non-fluorescente.
Microscopia fluorescentă este utilizat în microbiologie practice pentru indicarea și identificarea agenților infecțioși.

Fig. 1.16. Reprezentarea schematică a unui microscop cu fluorescență: 1 - 2 arc lampa- - quartz colector 3 - cuvă umplută cu soluție de sulfat de 4 unitățile medicale - Front kollektora- 5 - Filtru UV la 6 - 7 prizma- - placa de uraniu stekla- 8 - filtru ocular absorbant
Razele ultraviolete.

microscopie electronică

Caracteristici microscoape optice limitate prea mare lungime de undă a luminii vizibile (6000 A). Obiectele care sunt mai mici decât această valoare sunt dincolo de rezoluția unui microscop optic. La microscop electronic, in loc de unde luminoase folosind fascicule de electroni care au o lungime de undă extrem de scurtă și de înaltă rezoluție (Fig. 1.17).

Fig. 1.17. Schema de transmisie microscop electronic.

Ca sursa de electroni fascicule tun de electroni utilizat, baza este un fir de tungsten incalzit de curent electric. Între tungsten și anod în calea de electroni este un câmp electric de înaltă tensiune. Fascicul de electroni determină strălucirea ecranului fosforescent. Trecând prin obiectul ale cărui piese au grosimi diferite, electronii vor fi întârziată în mod corespunzător, care se va manifesta pe porțiuni de ecran intunecarea. Obiect dobândește contrast.

Formulările preparate pentru microscopie electronică de la cele mai bune filme coloidale a fost examinată după obiecte de uscare ( „medicamente native“), împroșcarea prin metale grele, ultrathin secțiuni ale metodei replica, și altele.

Microscopia electronică poate detecta cea mai mică structură pentru a obține o creștere de până la 200 000 sau pentru a vedea dimensiunea obiectelor 0,002 microni.

LV Timoșenko, MV Chubik

Distribuiți pe rețelele sociale:

înrudit